一,平板划线分离法
由接种环以菌操作沾取少许待分离的材料,在无菌平板表面进行平行划线,扇形划线或其他形式的连续划线,微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少,并逐步分散开来,如果划线适宜的话,微生物能一一分散,经培养后,可在平板表面得到单菌落.
二,稀释倒平板法
先将待分离的材料用无菌水作一系列的稀释(如 1 ∶ 10 , 1 ∶ 100 , 1 ∶ 1000 , 1 ∶ 10000 …),然后分别取不同稀释液少许,与已溶化并冷却至 45 ℃左右的琼脂培养基混合,摇匀后,倾入灭过菌的培养皿中,待琼脂凝固后,制成可能含菌的琼脂平板,保温培养一定时间即可出出菌落.如果稀释得当,在平板表面或琼脂培养基中就可出现分散的单个菌落,这个菌落可能就是由一个细菌细胞繁殖形成的.随后挑取该单个菌落,或重复以上操作数次,便可得到纯培养.
稀释涂布法:
优点:可以计数,可以观察菌落特征.
缺点:吸收量较少,较麻烦,平板不干燥效果不好,容易蔓延.
一般用于平板培养基的回收率计数!!
稀释混合平板法:
优点:可以计数,吸收量为1ml,较方便.
优点:不能观察菌落特征.
一般用于菌落总数的计数!!
平板划线法:
优点:可以观察菌落特征,对混合菌进行分离!!
缺点:不能计数
一般用于从菌种的分纯!
涂布法使用较多,但有时不均匀
稀释倒平板法操作相对麻烦,不适合好氧和对热敏感的细菌培养
应用范围:涂布法适用于 好氧菌
稀释倒平板法适用于厌氧,兼性厌氧